Circular RNA circ0001955 promotes cervical cancer tumorigenesis and metastasis via the miR-188-3p/NCAPG2 axis《Journal of Translational Medicine 》(IF=8.449)

背景：环状rna（环状rna）在多种恶性肿瘤中起着至关重要的作用。然而，环状rna在宫颈鳞状细胞癌（CSCC）中的确切作用仍在很大程度上是未知。

方法：采用实时荧光定量PCR和荧光原位杂交法检测circ0001955的表达情况。为了研究circ0001955对CSCC转移和生长的影响，我们进行了体外和体内的功能实验。在CSCC中，我们进行了核质分离、双荧光素酶报告实验、RNA反义纯化实验和拯救实验，以确认circ0001955、miR-188-3p和NCAPG2之间的相互作用。

结果：在这里，我们证实了一个来自CSNK1G1基因的一个环状rna（circ0001955）在CSCC中显著上调。circ0001955的过表达促进了肿瘤的增殖和转移，而下调circ0001955则产生了相反的作用。在机制上，circ0001955竞争性地结合miR-188-3p，并阻止miR-188-3p降低NCAPG2的水平，激活AKT/mTOR信号通路，诱导上皮间充质转化。值得注意的是，mTOR抑制剂的应用可显著拮抗circ0001955介导的CSCC肿瘤发生。

结论：circ0001955通过miR-188-3p/NCAPG2轴促进CSCC肿瘤的发生和转移，这为寻找CSCC新的治疗靶点提供了机会。

基于我们之前发表的研究，我们发现circ0001955在子宫颈致癌过程中表达上调，根据我们的微阵列数据，结果显示，与相邻的非肿瘤组织和正常细胞系相比，CSCC 0001955在CSCC组织和宫颈癌细胞系中显著上调。
Circ0001955增强了SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭，诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡。

为探讨circ0001955的潜在分子机制，我们利用miRanda数据库预测circ0001955和miR-188-3p可能的结合位点。

荧光素酶活性提示circ0001955可能直接与miR-188-3p结合。为了进一步证实circ0001955与miR-188-3p的结合，我们使用生物素化的circ0001955探针进行了RAP实验，结果显示circ0001955可以与AGO2蛋白结合，并且miR-188-3p在从circ0001955复合物中提取的rna中显著富集。

RNA FISH显示circ0001955和miR-188-3p共定位于细胞质中，这些数据表明circ0001955可以直接与miR-188-3p结合，并作为miR-188-3p的竞争性抑制剂。

与正常组织相比，CSCC组织中NCAPG2表达上调，并表明circ0001955和NCAPG2可能参与了CSCC的肿瘤发生和发展。

Circ0001955通过Circ0001955/miR1883p/NCAPG2轴促进SiHa细胞的增殖和侵袭，并激活AKT mTOR通路；NCAPG2的消耗显著增加了SiHa细胞中e-钙粘蛋白的水平，但降低了Snail和波形蛋白的水平，同时抑制了CSCC细胞中AKT/ mTOR通路的激活。

此外，circ0001955的过表达导致SiHa细胞中NCAPG2水平升高，EMT水平增强，并激活了AKT/mTOR通路。

体外实验表明，雷帕霉素可以逆转下调circ0001955所诱导的细胞增殖受损和细胞周期阻滞，Circ0001955加速了体内异种移植瘤的生长；我们证实了circ0001955通过miR-188-3p/NCAPG2轴介导的AKT/mTOR通路的激活促进了CSCC的增殖和转移。

我们不仅深入了解了环状rna在CSCC发生发展中的作用，而且还回顾了circ0001955作为CSCC潜在的预后生物标志物和有前途的治疗靶点。

作者使用伯信生物明星产品RAP试剂盒进行了上述分子互作调控机制的研究。